Évaluation des tests de bandelettes urinaires dans le cadre d'une infection expérimentale des voies urinaires porcines à Escherichia coli uropathogène

Rapports scientifiques volume 13, Numéro d'article : 12404 (2023) Citer cet article

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L’infection des voies urinaires est une maladie courante chez les porcs et l’une des principales raisons de réforme des truies. La maladie est cependant difficile à diagnostiquer en raison de l’absence de signes cliniques distincts chez les animaux. Nous avons évalué la valeur diagnostique de deux tests de bandelettes urinaires commerciales chez 10 porcs en utilisant un modèle expérimental d'infection des voies urinaires à Escherichia coli. L'urine collectée au départ et 48 h après l'inoculation a été analysée. Nous montrons que les tests par bandelettes positifs au sang, aux leucocytes et particulièrement aux nitrites sont très spécifiques des infections urinaires à E. coli avec une valeur prédictive positive de 100 %.

L'infection des voies urinaires (IVU) est une maladie courante chez les porcs et constitue un fardeau économique dans la production porcine, car la maladie peut influencer les performances de reproduction ou entraîner l'abattage de l'animal1,2. Pour maintenir la production et améliorer le bien-être des animaux, un traitement précoce est essentiel, car une intervention tardive peut augmenter le risque de pyélonéphrite ou d’échec du traitement2. Cependant, le diagnostic des infections urinaires dans les élevages commerciaux n'est pas facile à réaliser pour les raisons suivantes : (i) les porcs ne présentent pas de signes cliniques clairs de la maladie, ce qui rend difficile l'identification des sujets suspects ; (ii) l’étalon-or du diagnostic est une culture d’urine positive qui prend du temps, exigeant au moins 48 heures de travail en laboratoire pour identifier l’agent pathogène et la sensibilité aux antibiotiques associée3. Les tests par bandelettes urinaires constituent une méthode rapide et peu coûteuse qui peut faciliter l’identification précoce des animaux infectés. Bien qu'il ait été suggéré que les tests par bandelettes urinaires offrent une alerte précoce en cas d'infection urinaire chez le porc, ces études, ainsi que la plupart des études sur les infections urinaires porcines, sont basées sur des échantillons d'urine et de tissus prélevés sur des animaux présentant une infection urinaire spontanée ou sur des animaux de réforme dans des abattoirs ou des usines d'équarrissage ; par conséquent, les échantillons analysés proviennent de cas hétérogènes de la maladie ou ne représentent pas avec précision les spécimens biologiques collectés sur des animaux vivants1,4,5. De plus, les tests par bandelettes urinaires sont développés pour un usage humain et ne sont pas systématiquement utilisés chez les porcs. Par conséquent, la sensibilité diagnostique n’est pas validée de manière convaincante chez ces animaux1,3,6,7. Le but de cette étude était d'évaluer la valeur diagnostique des tests de bandelettes urinaires commerciales pour diagnostiquer les infections urinaires chez les porcs infectés par Escherichia coli uropathogène (UPEC) dans des conditions expérimentales contrôlées. L'étude a été facilitée par les progrès récents dans les modèles expérimentaux porcins d'UTI8,9,10,11,12.

Dix truies âgées de 7 semaines (Danish Landrace x Danish Yorkshire) ont été achetées auprès d'un vendeur local (Kokkenborg ApS) et hébergées dans l'animalerie du laboratoire biomédical de l'Université du Danemark du Sud. Les animaux étaient gardés dans des enclos communs avec une litière de sciure de bois et nourris avec une alimentation standard avec libre accès à l'eau. L'enrichissement a été apporté sous forme de jouets, de musique et d'interactions humaines quotidiennes. Les expériences ont été réalisées après 7 semaines d'hébergement lorsque les porcs avaient atteint un poids moyen de 72,7 kg (SD : 6,5). Les animaux ont été soignés au moins deux fois par jour et surveillés pour leur activité physique et leur consommation alimentaire à chaque inspection et pesés au moins une fois par semaine.

Les porcs ont été prémédiqués avec un mélange de 1 flacon de matière sèche zolazépam/tilétamine (Zoletil 50 Vet., Virbac Danmark) dissous dans 6,45 ml de Xylazin (Sedaxylan Vet., 20 mg·mL−1, Dechra Veterinary Products), 1,25 ml de kétamine ( Ketaminol Vet., 100 mg·mL−1, MSD Animal Health), 2 ml de butorphanol (Butomidor Vet., 10 mg·mL−1, Salfarm Danmark) et 2 ml de méthadone (Insistor Vet., 10 mg·mL−1, Salfarm Danemark). Chaque porc a reçu une injection intramusculaire de 1,3 ml · 10 à 1 kg de poids corporel. Les porcs ont été transférés au lit d'opération lorsque les réflexes musculaires étaient absents.

Nous avons utilisé l'isolat uropathogène d'E. coli UTI89, initialement isolé chez un patient humain atteint de cystite. Une colonie de plaques d'une nuit a été incubée pendant 21 h dans un bouillon de lysogénie (LB) et à partir de là, 100 µL ont ensuite été cultivés dans du LB frais pendant 24 h supplémentaires pour optimiser l'expression des pili de type 1. Le jour de l'infection, le bouillon a été centrifugé pendant 5 min à 5 000 g. Le culot a été remis en suspension dans une solution saline et ajusté à une densité optique de 1,0 à 600 nm, donnant une concentration bactérienne d'environ 1,109 unités formant colonie (UFC)·mL-1. Cette suspension a été diluée en série pour atteindre des concentrations finales d'inoculum de 1,102 UFC.mL-1 (vérifiées par étalement sur gélose). La suspension bactérienne a été préparée juste avant l'inoculation.